A107-腺苷脱氨酶临床诊断试剂盒

订货号:68.41.00.00-01801

腺苷脱氨酶临床诊断试剂盒使用说明书

（酶法连续监测法、液体三试剂）

用    途：
本试剂盒适用于体外定量测定人血清、血浆、胸腹水或脑脊液中的腺苷脱氨酶（ADA）活性。

临床意义：
肝脏病—ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT（r-GT）等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
血清中ADA活性的测定可①爱用于判断急性肝损伤及残留病变② 协助诊断慢性肝病③ 有助于肝纤维的诊断④   有助于黄疸的鉴别腺苷脱氨酶（ADA）在良恶性难辨的滲出液鉴别诊断上有重要价值。结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高。此外，脑脊液ADA检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎ADA活性显著增高，病毒性脑炎不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高。

原    理：
本方法原理反应方程式如下：
          Adenosine + H2O     ADA       Inosine  +  NH4 
  NH4 + 2-Ketoglutarate + NADPH     GLDH     Glutamate + NADP + H2

应用腺苷脱氨酶偶联谷氨酸脱氢酶反应连续监测法。腺苷脱氨酶酶解腺苷反应产生氨，再通过偶联谷氨酸脱氢酶的作用，还原NADPH成为NADP，从而得以测定NADPH在340 nm处吸光度下降的速度，通过测量340nm处吸光度下降的速度，可以测算腺苷脱氨酶的活性大小。

试剂组成：
  试剂Ⅰ   NADPH                            0.2 mmol/L

            试剂Ⅱ   α-Ketoglutarate                  15 mmo1/L

             Glutamate Dehydrogenase          50000 U/L

             试剂Ⅲ   Adenosine                        10 mmo1/L

试剂配制：
本试剂盒为液体三试剂，可直接上机使用。
如果受限于分析仪只能接受双试剂，则可以在测试前依比例（见试验参数）混合试剂Ⅰ及试剂Ⅱ成为一混合剂（混合后可以至少稳定10天），配合试剂Ⅲ使用。

  不建议将三个试剂混合成单试剂使用，因为这样一来无法消除内、外源干扰。

试剂的稳定与贮存期：
自生产日期起，避光保存2-8℃可稳定一年。室温（20℃）至少稳定12小时。

样品要求：
血清、胸腹水或脑脊液。如果有需要可以进行抗凝处理。





　

试验参数与操作步骤：
温度：        37 ℃ 
波长：        340 nm （主）&  450 nm （副）
比色杯光径：  1.0 cm    or    0.6 cm
测试方法：    速率法
反应方向：    负
予孵育：      0.01 ml样品 + 0.2 ml试剂Ⅰ+ 0.025 ml试剂Ⅱ（或依此比例混匀）
予孵育时间：  5分钟
启动反应：    加0.025 ml试剂Ⅲ （或依比例混匀）
延迟时间：    90秒
测试时间：    90秒
计算测试时间段每分钟平均吸光度的变化(△A/min)。
理论K值 ：     -4180 （L = 1.0 cm）

计    算：
              △A/min×Tv×1000 
 ADA (U/L) =
               ε×Sv×L
 ε:     毫摩尔消光系数    NADH = 6.22
Tv:      总反应体积(ml) 
Sv:      样品体积(ml)
L :      比色杯光径(cm)                         

注意事项：
1.试剂和样品用量可因仪器不同，按比例增减。
2.若反应吸光值变化大于0.20 A/min，须用生理盐水稀释样品，结果乘以稀释倍数。
3.如保存不当，试剂发现有混浊或吸光度在340 nm处 < 1.0 时，应弃用。

试剂性能：
线性范围:   0―200 U/L
灵敏度:      每分钟0.00024的光吸收值变化大约相当于1 U/L
准确性:      测定定值质量控制血清，测定值在定值±10%的范围以内.
精密度:      CV < 2

参 考 值：
5~15 U/L，各实验室需要自行订定预期参考值

仪    器：
全自动、半自动生化分析仪或可见光分光光度计

           地址：北京市海淀区上地东里4号楼科贸大厦304室中西集团公司（100085）        E-mail： bzhang@midwest.com.cn      
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