【用途】
本试剂盒主要用于大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、催眠克雷伯氏菌头孢噻肟
(包括头孢唑肟、头孢曲松)MIC的测定及广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测。
本试剂盒中的药物及浓度根据NCCLS标准设定。
【原理】
大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、催眠克雷伯氏菌发酵培养基中的葡萄糖,
产生的酸使pH值下降,在指示剂作用下,培养基由原先的红色变为黄色;
克拉维酸可抑制β-内酰胺酶的活性,在头孢噻肟中添加克拉维酸后
通过对比试验就可检测出细菌是否产生广谱β-内酰胺酶。
产品的实验操作是在一块反应板条的20个反应孔中进行的,见下表:
孔号
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1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
药物
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对照 |
头孢噻肟 |
浓度μg/ml
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0.25 |
0.5 |
1 |
2 |
4 |
8 |
16 |
32 |
64 |
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孔号
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11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
16 |
17 |
18 |
19 |
20 |
药物 |
对照
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头孢噻肟/克拉维酸 |
浓度μg/ml |
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0.25/4 |
0.5/4 |
1/4 |
2/4 |
4/4 |
8/4 |
16/4 |
32/4 |
64/4 |
【操作方法】
- 试剂瓶外观:药敏培养基为澄清的红色液体,稀释液为透明无色液体
如果出现浑浊,则表明受到污染,弃用。
- 样本采集:取平板上生长的单个菌落或培养的菌液,经鉴定为大肠埃希氏菌
肺炎克雷伯氏菌或催眠克雷伯氏菌。
- 用接种环挑取菌落,在稀释瓶瓶壁上研磨,尽量使细菌均匀分散于液体中;
也可直接取菌悬液在稀释瓶中混匀。
- 将稀释瓶和比浊瓶比较,尽量使两者浑浊度一致。
- 取稀释瓶中菌液100μl,加入药敏培养基中,充分混匀。
- 打开铝箔袋,取其中一块进行药敏试验,另一块放回,2个月内使用,避免受潮。
- 撕开板条上的胶带,每孔加入100μl含菌的药敏培养基。
- 每孔滴加一滴无菌石蜡油,封上胶带,35℃培养。
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