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【用途】
本试剂盒用于解脲脲原体（U.u）和人型支原体（M.h）的培养、鉴定、计数及十项药敏,
【原理】
 本试剂盒培养基中含有蛋白胨、酵母抽提物、马血清等适合支原体生长的营养因子
U.u和M.h在生长过程中，分别分解尿素和精氨酸，产生的碱性物质引起pH值上升
在指示剂作用下，培养基由黄色变为红色。培养基中含有大量抗菌物质，可抑制细菌
真菌等微生物的生长。
本试剂盒中的药物及浓度根据CASFM标准设定，通常用于常规治疗的首选。
产品的实验操作是在一块反应板条的20个反应孔中进行的，见下表：
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孔号
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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7
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8
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9
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10
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药物
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对照
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鉴定
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U.u计数
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M.h计数
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红霉素
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四环素
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氧氟沙星
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环丙沙星
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罗红霉素
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罗红霉素
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浓度µg/ml
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104ccu
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104ccu
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1
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4
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1
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1
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1
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4
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孔号
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11
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12
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13
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14
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15
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16
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17
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18
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19
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20
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药物
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阿齐霉素
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阿齐霉素
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交沙霉素
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交沙霉素
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克拉霉素
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克拉霉素
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美满霉素
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美满霉素
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强力霉素
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强力霉素
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浓度µg/ml
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1
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4
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2
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8
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1
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4
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4
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8
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4
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8
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【操作方法】
- 培养基外观：运输液为澄清，略带黄色的液体；冻干培养基为黄色块状固形物。
- 样本采集：
男性：用无菌拭子取尿道分泌物，也可取不育者的精液。
女性：用无菌拭子取宫颈分泌物。
其它样本为前列腺液、羊水、脑脊液、支气管分泌物、初段尿等，但不推荐使用。
- 接种：采集样本后的拭子插入运输液，旋转数次，待拭子中的样品渗出，弃拭子
其它样本取0.2ml直接加入运输液，尿液需2000rpm离心20min，取沉渣0.2ml。
- 打开冷冻干燥培养基的瓶塞，将上述含有样本的运输液全部倒入，充分混匀。
- 打开铝箔袋，取其中一块进行药敏试验，另一块放回，2个月内使用，避免受潮。
- 撕开板条上的胶带，将混合均匀的培养液用加样器准确量取100μl，分别加入板条各孔中。
- 在板条每孔中加入1滴无菌石蜡油，注意不要滴在孔外，以免封上胶带时粘贴不牢。
- 再次封上胶带，将板条和剩余培养基放置35～37℃，培养24～48小时，观察结果。
【结果观察】
- U.u应当在24hr观察结果，而M.h要延长至48hr，板条各分离孔不变色为阴性。
- 板条上分离孔变为红色，且清亮透明，有U.u或M.h生长，分为两种情况：
- 对照孔、鉴定孔变色，计数孔没有变红，表明感染量<104CCU/ml
根据临床情况决定是否治疗。
- 对照孔、鉴定孔及计数孔都变色，表明感染量≥104CCU/ml，需治疗。
- 药敏结果判断：药敏孔变色，表明分离到的U.u或M.h对该种抗生素耐药。
单浓度抗生素测试会出现高敏和耐药两种情况；双浓度抗生素测试有高敏、中敏及耐药三种情况。
- 当分离孔有U.u或M.h生长时，鉴定孔应该变色，如果不变色，表明可能为杂菌污染。
具体情况见下表：
| 各孔编号 |
1
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2
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3
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4
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5～20
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正常结果解释
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结果
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－
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－
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－
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－
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－
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无U.u或M.h感染
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+
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－
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±
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±
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±
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可能为杂菌污染
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+
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+
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－
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－
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±
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U.u或M.h感染，<104CCU/ml
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+
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+
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+
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－
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±
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U.u感染，≥104CCU/ml
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+
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+
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－
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+
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±
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M.h感染，≥104CCU/ml
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+
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+
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+
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+
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±
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U.u和M.h混合感染，≥104CCU/ml
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【注意事项】
- 各试剂瓶开启后在半小时内使用，不可再长期存放
- 由于含有抑制杂菌的抗生素，本产品操作时不需严格无菌操作，但操作者应防止受到样本的潜在感染。
- 使用过的板条、试剂瓶等应高压灭菌后丢弃。
- 接种样本的培养基要混合均匀，防止加入板条孔中时接种量不均一。
- 如果出现培养瓶变色，而板条各孔都不变色，可能原因是样本中U.u或M.h含量太低，结果以板条为准。
- 由于接种的样本大多含有不溶物，有可能会导致接种量不均一
药敏结果不合理（高浓度孔阳性，低浓度孔阴性）。这种情况下应弃用该种药物。
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