【用途】
主要用于微生物感染患者的血液、脑脊液和尿液等样品中分离得到的葡萄球菌属细菌的快速药物敏感性试验。
本试剂盒中的药物及浓度根据NCCLS标准设定,通常用于常规治疗的首选。
本试剂盒同时进行13项药敏试验,供治疗选择的药物有21种
同时预测所有β-内酰胺类抗生素的药敏试验结果。
【原理】
葡萄球菌属细菌发酵培养基中的葡萄糖,产生的酸使pH值下降,在指示剂作用下
培养基由原先的红色变为黄色。
产品的实验操作是在一块反应板条的20个反应孔中进行的,见下表:
孔号
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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7
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8
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9
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10
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药物
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对照
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青霉素
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青霉素
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苯唑西林
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苯唑西林
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庆大霉素
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阿米卡星
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万古霉素
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万古霉素
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四环素
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浓度ug/ml
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0.12
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0.25
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0.25
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2
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4
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16
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4
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16
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4
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孔号
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11
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12
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13
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14
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15
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16
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17
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18
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19
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20
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药物
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红霉素
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红霉素
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氧氟沙星
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诺氟沙星
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甲氧苄胺嘧啶
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克林霉素
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克林霉素
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复合磺胺
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复合磺胺
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氯霉素
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浓度ug/ml
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0.5
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4
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2
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4
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8
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0.5
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2
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2/38
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4/76
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8
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【操作方法】
- 试剂瓶外观:药敏培养基为澄清的红色液体,稀释液为透明无色液体,如果出现浑浊
则表明受到污染,弃用。
- 样本采集:取平板上生长的单个菌落或培养的菌液,革兰氏染色镜检,如为单一的葡萄球菌
可使用本试剂盒。
- 用接种环挑取菌落,在稀释瓶瓶壁上研磨,尽量使细菌均匀分散于液体中;
也可直接取菌悬液在稀释瓶中混匀。
- 将稀释瓶和比浊瓶比较,尽量使两者浑浊度一致。
- 取稀释瓶中菌液100μl,加入药敏培养基中,充分混匀。
- 打开铝箔袋,取其中一块进行药敏试验,另一块放回,2个月内使用,避免受潮。
- 撕开板条上的胶带,每孔加入100μl含菌的药敏培养基。
- 每孔滴加一滴无菌石蜡油,封上胶带,35℃培养。
【结果观察】
- 培养基颜色变为黄色或橙黄色,为阳性,不变色为阴性。
- 培养4小时后观察结果,如果对照孔阴性则继续培养,直至对照孔变为黄色。
- 培养时间不能超过20小时,超过此培养时间,结果不可信。
- 如果培养16~20小时后各孔依旧不变色,但对照孔培养基已浑浊
则表明测试菌不是葡萄球菌属,应鉴定后重新实验。
【注意事项】
- 各试剂瓶为无菌产品,开启后应尽快使用,不可再长期存放。
- 本产品操作应无菌操作,否则可能影响结果。
- 培养基中的菌液应混合均匀,避免出现不合理的药敏结果
如果出现高浓度孔阳性,低浓度孔阴性的结果,则弃用该种药物。
- 使用过的试剂瓶及板条灭菌处理后方可丢弃
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